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牛高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒

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牛高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒僅供研究使用

實驗類型:夾心法
檢測范圍:3.75 ng/mL – 120 ng/mL
最低檢測限:0.1 ng/mL
應用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細胞培養物上清或其它相關液體(本產品僅供實驗室科研及非臨床用途)

 

實驗原理:                                     

將目標抗體包被于微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的目標連接于固相載體上的抗體結合,然后加入微生物化的目標抗體,將未結合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標記和親和素,再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。


試劑盒組成:

 

 

 

 

試劑盒操作步驟:

 

 

 

 

實驗所需自備試驗器材:

1. 酶標儀(450nm

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL2-20uL20-200uL200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

 

實驗結果計算:

 

繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。

 

 

 

 

技術小提示:

1. 當混合或重溶蛋白溶液時,盡量避免起沫。

2. 為了避免交叉感染,配置不同濃度標準品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽。

3. 每次孵育時,請正確使用封板膠可保證結果的準確性。

4. 混合后的顯色底物在上板前應為無色,請避光保存;假如微孔板后,將由物色變成不同深度的藍色。

 

5. 終止液上板順序應同顯色底物上板順序一致;加入終止液后,孔內顏色由藍變黃;若孔內有綠色,則表明孔內液體未混勻;請充分混合。

 

產品有效期:6個月

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